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本公眾號曾提到過目前越來越多的醫療機構是用雪貂來做動物模型,以及使用其做醫學研究的意義。那具體在進行試驗的時候,到底應該如何進行操作呢?本文將就此做一個簡單的介紹。
保 定
保定一般分為人工保定、器械保定和化學保定。
人工保定是最常用的保定方式,這種保定方式下可進行動物體檢、觀察、給藥等操作。考慮到雪貂的行為習性,強烈建議要做好防抓咬措施,比如佩戴防抓咬手套。手套需既能保護操作人員的安全,又兼具靈活性可以安全地操作動物。抓取時,可以一只手的手掌貼著動物肋骨從前肢后方將它”舀“起(圖1),另一只手輕柔地抓住其頭肩部背側的松軟皮毛,待抓實后,托住肋骨的手就可以轉而來撐住動物的后肢,使得其呈直立的狀態。抓取得當的話,動物會表現得溫順和放松,伴隨“打哈欠”的反應(圖2)。抓取時需要注意的是,一定要托住動物的下肢(遠端),避免動物身體搖晃,由于重力作用壓迫到氣管造成氣道阻塞。
當需要保定稍長時間時,則優先考慮器械保定,器械保定的方式多種多樣,簡單的甚至用毛巾將雪貂包裹起來,前肢緊貼身體,露出頭部即可。復雜一點的,就可以使用圓管或錐體管,將動物更牢固地保定住。圖3就是一個圓管,通過利用雪貂“愛鉆洞”的特性,可以輕松使其鉆入其中,再將后面用蓋子固定防止它退出。管道建議使用透明材質,這樣方便觀察動物在里面時的呼吸情況和行為,同時保定器械的細節設計還應確保動物能自由呼吸和充分散熱。從福利角度來說,動物在保定器械中的時間不宜過長(通常不超過30-45分鐘),且建議通過逐漸增加在保定圓管中的時間,讓動物逐漸適應該保定裝置。
化學保定,則是因為一些特殊操作需要完全固定住動物如鼻內和氣管內給藥以及顱內腔靜脈血液采集。注射麻醉劑需要的恢復時間較長(30-60分鐘),而吸入麻醉是快速可逆的,動物可在3-5分鐘內恢復。典型的藥物包括注射麻醉劑,如氯胺酮、氯胺酮/塞拉嗪混合物、替來他明加唑拉西泮,以及吸入麻醉劑,如異氟烷。動物麻醉后,需要監護其呼吸情況和體溫,因為麻醉劑容易導致動物一過性的體溫降低。據報道,異氟烷麻醉會導致動物一過性的(45分鐘左右可恢復)血細胞壓積、紅細胞(RBC)計數、血紅蛋白濃度降低,主要是由于脾臟內的紅細胞被暫時“封存”導致。因此如果使用異氟烷麻醉時,采集的臨床病理血樣應格外注意這點。
給 藥
和其他常規實驗動物類似,雪貂主要的給藥方式有口服,皮下注射、肌肉注射、靜脈注射和腹腔注射。每公斤雪貂的推薦給藥容積和針頭大小如表1。
表1:雪貂的推薦給藥容積和針頭大小a
a. 本表借鑒自Cornell University Center for Animal Resources and Education
b. ≤21G 針頭
c. ≤23G 針頭
雪貂的皮下注射、肌肉注射和腹腔注射的操作流程方法和常規實驗動物的操作類似,皮下注射多選取頸背部皮膚,肌肉注射多選取后肢肌肉,腹腔注射選取腹部的右下區域,靜脈注射常選取頭靜脈、頸靜脈或者腔靜脈。
口服給藥:
如果給予的口服藥物比較美味,雪貂會自主將注射器內的藥物喝下,成年雪貂每分鐘可以自主飲下10毫升的液體,單次可服下最多100毫升。
經口灌胃給藥:
適用于需要精準劑量的給藥,或是雪貂不愿自主采食時。灌胃前需要先測量灌胃管的長度并進行標記(給藥管一般不粗于5mm), 長度則是從嘴到最后一根肋骨下大約1英寸的位置。位置確定后,一人保定住雪貂,另一人進行給藥操作,如圖4所示,先用開口器(bite block)將雪貂嘴巴打開,將灌胃管輕柔快速的插入食道至標記位置,需要的話可以用潤滑劑潤滑灌胃管。通過將灌胃管的另一頭插入盛有水的水杯中,來確定灌胃管插入位置是否正確。如正確,水不會冒泡,如不正確,則水會冒泡或者被吸入管內(圖5)。位置確認正確后,即可把注射器連在灌胃管上進行給藥。通常給藥量5-15毫升,單次給藥量絕不能超過50毫升。
良好的保定和給藥操作技術,既能保證動物的舒適安全,人員的安全,進而能夠確保試驗的順利進行。同時在試驗設計時,應關注給藥容積的最大限定量,保證動物的福利。
來源:實驗動物那些事兒公眾號
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