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作為一只Cre工具鼠，我是基因工程的產(chǎn)物，專為科學(xué)研究而生。我體內(nèi)攜帶的Cre重組酶基因，能與另一個(gè)伙伴的LoxP位點(diǎn)相互作用，構(gòu)成Cre-LoxP系統(tǒng)的基礎(chǔ)。在實(shí)驗(yàn)小鼠族群中，我的核心從業(yè)優(yōu)勢(shì)在于可以為時(shí)空特異性的基因操控需求賦能。

在科研應(yīng)用上，我總是大顯身手：

神經(jīng)系統(tǒng)探索：當(dāng)Cre表達(dá)被限定在特定神經(jīng)元亞群時(shí)，我?guī)椭芯咳藛T揭示特定腦區(qū)或神經(jīng)回路的功能，以及與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的基因作用機(jī)制。

腫瘤學(xué)研究：通過協(xié)助條件性激活或失活致癌基因，我在模擬人類腫瘤發(fā)展、研究腫瘤生物學(xué)及測(cè)試治療策略方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。

代謝研究：如果需要在特定代謝器官中調(diào)控基因，也少不了我的身影，我給肥胖、糖尿病等代謝性疾病的研究提供了重要的體內(nèi)模型。

現(xiàn)在，我正和我的兄弟姐妹們住在一個(gè)個(gè)小房子里，什么?你問我們各有什么神通本領(lǐng)?不如直接來看看我們的登記名錄：

賽業(yè)生物工具鼠列表(精選)

Cre工具鼠

Cre工具鼠&熒光標(biāo)記模型

誘導(dǎo)型Cre工具鼠

誘導(dǎo)型Cre工具鼠&熒光標(biāo)記模型

Dre工具鼠

其他

模型驗(yàn)證——以Cyp19a1-IRES-Cre小鼠為例

將Cyp19a1-IRES-Cre小鼠與Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，產(chǎn)生雙基因雜合子代小鼠，Cre酶介導(dǎo)的重組將導(dǎo)致tdTomato蛋白在子代Cre陽(yáng)性細(xì)胞中表達(dá)。分別采集6周齡子代小鼠的卵巢、睪丸和腦組織，通過免疫熒光染色觀察Cre重組酶的表達(dá)情況。其基因型為——實(shí)驗(yàn)組(Cre+)：Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+];對(duì)照組(Cre-)：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]。

Cre重組酶在雌性生殖腺中的表達(dá)情況

圖1 雌性小鼠卵巢免疫熒光染色[1]

Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])雌性小鼠在卵巢顆粒細(xì)胞中存在大量的tdTomato蛋白紅色熒光，表明在該部位存在大量的Cre重組酶表達(dá)，而對(duì)照組(Cre-)小鼠中檢測(cè)不到tdTomato紅色熒光的表達(dá)，不存在Cre重組酶的表達(dá)。

Cre重組酶在雄性生殖腺中的表達(dá)情況

圖2 雄性小鼠睪丸免疫熒光染色[1]

Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])雄性小鼠在少量睪丸細(xì)胞中存在紅色熒光，其定位與DAPI部分重合，表明這些細(xì)胞可能為睪丸支持細(xì)胞或其他類型細(xì)胞;而對(duì)照組(Cre-)小鼠中檢測(cè)不到tdTomato紅色熒光的表達(dá)，不存在Cre重組酶的表達(dá)。

Cre重組酶在腦海馬區(qū)的表達(dá)情況

圖3 腦部海馬區(qū)免疫熒光染色[1]

Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])小鼠在海馬CA區(qū)域結(jié)構(gòu)(圖中白色框內(nèi)位置)中存在部分的紅色熒光，顯示在此類區(qū)域中Cre發(fā)生重組;而對(duì)照組(Cre-)小鼠中檢測(cè)不到tdTomato紅色熒光的表達(dá)，不存在Cre重組酶的表達(dá)。(海馬CA區(qū)：Hippocamp formation-CA，包括CA1和CA2)

Cre重組酶在腦室、纖維束和腦核區(qū)域的表達(dá)情況

圖4 腦室、纖維束和腦核免疫熒光染色[1]

Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])小鼠在側(cè)腦室、終紋、尾殼核結(jié)構(gòu)中存在部分的紅色熒光，顯示在此類區(qū)域中Cre發(fā)生重組;而對(duì)照組(Cre-)小鼠中檢測(cè)不到tdTomato紅色熒光的表達(dá)，不存在Cre重組酶的表達(dá)。(纖維束區(qū)域：終紋-Stria terminalis，圖中左側(cè)箭頭所示部位;腦室區(qū)域：腦側(cè)腦室-Lateral ventricle，圖中中間箭頭所示部位;腦核區(qū)域：尾殼核-Caudoputamen，圖中右側(cè)箭頭所示部位)

總結(jié)

Cyp19a1-IRES-Cre小鼠模型中Cre重組酶的表達(dá)主要定位于卵巢顆粒細(xì)胞中，同時(shí)也可以在腦部的海馬區(qū)、腦室、纖維束和腦核中的部分細(xì)胞中發(fā)生由Cre重組酶介導(dǎo)的重組，Cre重組酶的表達(dá)與小鼠內(nèi)源性Cyp19a1基因的表達(dá)模式相似，具有良好的特異性。

來源：賽業(yè)生物

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